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摘要
本发明涉及缺血修饰白蛋白检测技术领域,特别涉及一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂,包括试剂1和试剂2,试剂1中含有0.1-1%的烷基糖苷APG1214和0.1-1%的Emulgen709。在R1试剂中加入两种特殊的非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214和Emulgen709,不仅显著改善测定的性能,而且对维护体系的透明,防止出现白色浑浊,效果明显,相比之前所用的吐温-80、Tritonx-100、聚氧乙烯月桂醚等有更好的效果,显著提高了检测试剂的抗肝素干扰能力。
法律状态
| 法律状态公告日 | 20150617 |
| 法律状态 | 授权 |
| 法律状态信息 | 授权 |
| 法律状态公告日 | 20140312 |
| 法律状态 | 实质审查的生效 |
| 法律状态信息 | 实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/68申请日:20131104 |
| 法律状态公告日 | 20140205 |
| 法律状态 | 公开 |
| 法律状态信息 | 公开 |
权利要求
权利要求数量(4)
独立权利要求数量(2)
1.一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于包括试剂1和试剂2,其中,
试剂1中含有0.1-1%的烷基糖苷APG1214和0.1-1%的Emulgen709。
2.一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于包括试剂1和试剂2,其中,
试剂1中各组分重量百分含量如下:
去离子水 86.9-88.7%,
缓冲液 10%,
CoCl 2·6H2O 0.1%,
防腐剂 1%,
烷基糖苷APG1214 0.1-1%,
Emulgen709 0.1-1%;
调整pH值到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量如下:
去离子水 88%,
缓冲液 10%,
二硫苏糖醇 1%,
防腐剂 1%,
调整pH值到5.9。
3.根据权利要求2所述的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液,试剂1 pH值为7.5,试剂2 pH值为5.9。
4.根据权利要求2所述的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于所述防腐剂为NaN 3。
1.一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于包括试剂1和试剂2,其中,
试剂1中含有0.1-1%的烷基糖苷APG1214和0.1-1%的Emulgen709。
2.一种抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于包括试剂1和试剂2,其中,
试剂1中各组分重量百分含量如下:
去离子水 86.9-88.7%,
缓冲液 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
防腐剂 1%,
烷基糖苷APG1214 0.1-1%,
Emulgen709 0.1-1%;
调整pH值到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量如下:
去离子水 88%,
缓冲液 10%,
二硫苏糖醇 1%,
防腐剂 1%,
调整pH值到5.9。
3.根据权利要求2所述的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液,试剂1 pH值为7.5,试剂2 pH值为5.9。
4.根据权利要求2所述的缺血修饰白蛋白检测试剂,其特征在于所述防腐剂为NaN3。
说明书
实施例1:一种现有的缺血修饰白蛋白检测试剂
试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.9%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
实施例2:本发明的抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂
试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.7%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
烷基糖苷APG1214 0.1%,
Emulgen709 0.1%,
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例试剂的使用方法:
本实施例描述的抗肝素干扰的IMA检测试剂,首先随机抽取20个新鲜的临床样本,将每一份新鲜样本分成两组,一组放在普通的KHB离心管中,另一组放置在肝素钠(肝素钾或肝素锂)离心管中同时放在离心机中离心处理,在使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析仪,如东芝40全自动分析仪等,将R1和R2按照体积2:1的比例放置到对应的试剂位上,在样品盘的对应位置放置好蒸馏水、标准品和样本,分别使用实施例1中的配方配置的IMA检测试剂和实施例2中加入非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214和Emulgen709的IMA检测试剂同步对40个样本进行检测。操作如表1:
表1检测条件及工艺
计算:缺血修饰白蛋白含量(μmol/L)=(??A测定/min÷??A标准/min)×C标准。
3)准确度实验:利用实施例2中本发明的配方配制试剂,与实施例1中原始方法配制的IMA检测试剂照检测,按照上述使用方法进行试验。检测结果见表2,当检测样本全部是KHB样本时实施例1和实施例2的20个样本的相对偏差最大为4.78%,相关系数为0.998654,两者相关性很强。当使用实施1试剂检测不同类型的处理的样本时相对偏差极大,最大到达94.50%,相关系数仅为0.85,最后用实施例2检测不同类型处理的样本时相对偏差最大为4.43%,相关系数为0.998457,相关性非常好,见表3和表4。说明在实施例2中加入烷基糖苷APG1214和Emulgen709两种非离子表面活性剂后,能够在检测结果上能够很好排除肝素的干扰,样本的准确度很高。
表2实施例1与实施例2试剂检测检测KHB样本结果
表3实施例1试剂检测不同类型样本对比检测结果
表4实施例2试剂检测不同类型样本对比检测结果
4)实施例1与实施例2试剂反应曲线的对比:
对同一检测样本,将实施例1和实施例2的反应曲线,进行对比发现,实施例1的反应曲线(见图1)在加入R1试剂后曲线出现波动,并且曲线有上扬的趋势,说明肝素与试剂中的成分发生了反应,影响了反应曲线,这也从测名证明了为什么实施例1中的对于不同类型的样本的检测结果相关性差的原因,而本实施例中的反应曲线(见图2)却非常的好,说明两种非离子表面活性剂对排除肝素的干扰起到了很好的效果。
实施例3:抗肝素干扰的缺血修饰白蛋白检测试剂
1)试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 86.9%
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%
CoCl2·6H2O 0.1%
NaN3 1%
烷基糖苷APG1214 1%
Emulgen709 1%
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到7.5。
2)试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%
DTT 1%
NaN3 1%
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例描述的是将烷基糖苷APG1214 和Emulgen709的重量百分比同时由0.1%加大到1%后IMA试剂抗肝素干扰的能力;
3)其操作方式与实施例1中的操作方式相同;
4)准确度实验:利用本实施例中配比配制试剂,与实施例2中方法配制的检测试剂照检测,按照上述3)中的使用方法进行试验。
检测结果见表5和表6,表明当检测样本全部是KHB样本时,实施例3和实施例2的20个样本的相对偏差最大为3.95%,相关系数为0.9993,两者相关性很强;当检测样本全是肝素样本时实例和实例2方法配制的试剂20个样本的相对偏差最大为-3.83%,相关性为0.999321,因此说明在实施例2中加入烷基糖苷APG1214和Emulgen709两种非离子表面活性剂重量百分比同时由0.1%加大到1%后,IMA试剂抗肝素干扰的能力依然很好,样本的准确度高。
表5实施例3与实施例2试剂检测KHB对比检测结果
表6 实施例3与实施例2试剂检测肝素样本对比检测结果
5)实施例3试剂与实施例2试剂反应曲线的对比:
对同一检测样本,绘制实施例3和实施例2的反应曲线,见图3和图4,反应曲线能够做到等效,说明两种非离子表面活性剂分别将浓度扩大到1%,同样对反应曲线起到良好的作用。
实施例4:一种现有的加入吐温-80的缺血修饰白蛋白检测试剂
1)试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.8%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
吐温-80 0.1%
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例描述的是在试剂1中加入吐温-80后IMA试剂抗肝素干扰的能力;
3)其操作方式与实施例1中的操作方式相同;
4)准确度实验:利用本实施例中配比配制试剂,与实施例2中方法配制的检测试剂照检测,按照上述3)中的使用方法进行试验。
检测结果见表7,当检测样本全是肝素样本时实例4和实例2方法配制的试剂20个样本的相对偏差最大为72.15%,相关性为0.872019,因此说明在实施例2中加入吐温-80非离子表面活性剂后,IMA试剂抗肝素干扰的能力较差,样本检测的准确度比较差。
表7实施例4与实施例2试剂检测肝素样本对比检测结果
实施例5:一种现有的加入Tritonx-100的缺血修饰白蛋白检测试剂
1)试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.8%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
Tritonx-100 0.1%
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例描述的是在试剂1中加入Tritonx-100后IMA试剂抗肝素干扰的能力;
3)其操作方式与实施例1中的操作方式相同;
4)准确度实验:利用本实施例中配比配制试剂,与实施例2中方法配制的检测试剂照检测,按照上述3)中的使用方法进行试验。
检测结果见表8,当检测样本全是肝素样本时实例和实例2方法配制的试剂20个样本的相对偏差最大为-34.60%,相关性为0.944115,因此说明在实施例2中加入Tritonx-100后两种非离子表面活性剂后,IMA试剂抗肝素干扰的能力较差,样本检测的准确度比较差,说明加入Tritonx-100后抗肝素能力较差。
表8实施例5与实施例2试剂检测肝素样本对比检测结果
实施例6:一种现有的加入聚氧乙烯月桂醚缺血修饰白蛋白检测试剂
1)试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.8%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
聚氧乙烯月桂醚 0.1%
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例描述的是在试剂1中加入聚氧乙烯月桂醚后IMA试剂抗肝素干扰的能力;
3)其操作方式与实施例1中的操作方式相同;
4)准确度实验:利用本实施例中配比配制试剂,与实施例2中方法配制的检测试剂照检测,按照上述3)中的使用方法进行试验。
检测结果见表9,当检测样本全是肝素样本时实例和实例2方法配制的试剂20个样本的相对偏差最大为59.34%,相关性为0.936005,因此说明在实施例6中加入聚氧乙烯月桂醚两种非离子表面活性剂后,IMA试剂抗肝素干扰的能力较差,样本检测的准确度比较差,说明抗肝素的能力较差。
表9实施例6与实施例2试剂检测肝素样本对比检测结果
实施例7:一种单独加入烷基糖苷APG1214的缺血修饰白蛋白检测试剂
1)试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.8%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
烷基糖苷APG1214 0.1%
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例描述的是在试剂1中加入烷基糖苷APG1214后IMA试剂抗肝素干扰的能力;
3)其操作方式与实施例1中的操作方式相同;
4)准确度实验:利用本实施例中配比配制试剂,与实施例2中方法配制的检测试剂照检测,按照上述3)中的使用方法进行试验。
检测结果见表10,当检测样本全是肝素样本时实例和实例2方法配制的试剂20个样本的相对偏差最大为-59.43%,相关性为0.972192,因此说明在实施例7中单独加入烷基糖苷APG1214 一种非离子表面活性剂后,IMA试剂抗肝素干扰的能力不能达到预期的效果,样本检测的准确度比较差,说明这种方式配制的IMA检测试剂抗肝素的能力较差。
表10实施例7与实施例2试剂检测肝素样本对比检测结果
实施例8:一种单独加入Emulgen709的缺血修饰白蛋白检测试剂
1)试剂1中各组分重量百分含量:
去离子水 88.8%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
CoCl2·6H2O 0.1%,
NaN3 1%,
Emulgen709 0.1%
将上述成分混合后即试剂1(钴离子试剂),并用HCl或者NaOH将pH值调整到7.5;
试剂2中各组分重量百分含量:
去离子水 88%,
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris) 10%,
DTT 1%,
NaN3 1%,
将上述成分混合后即试剂2(硫苏糖醇试剂),并用HCl或者NaOH将PH值调整到5.9。
2)本实施例描述的是在试剂1中加入聚氧乙烯月桂醚后IMA试剂抗肝素干扰的能力;
3)其操作方式与实施例1中的操作方式相同;
4)准确度实验:利用本实施例中配比配制试剂,与实施例2中方法配制的检测试剂照检测,按照上述3)中的使用方法进行试验。
检测结果见表11,当检测样本全是肝素样本时实例和实例2方法配制的试剂20个样本的相对偏差最大为33.08%,相关性为0.956576,因此说明在实施例8中单独加入Emulgen709一种非离子表面活性剂后,IMA试剂抗肝素干扰的能力也不能达到预期效果,样本检测的准确度比较差,说明在IMA检测试剂中单独加入Emulgen709是不行的。
表11实施例8与实施例2试剂检测肝素样本对比检测结果
通过验证,在试剂中加入非离子表面活性剂烷基糖苷APG1214和Emulgen709得到的检测试剂检测肝素样本与普通的KHB临床样本相关性好,临床检测样本结果一致,能够达到市场对产品的应用要求,为临床检测提供了很大的方便。
价值度评估
技术价值
经济价值
法律价值
0 0 061.0分
0 50 75 100专利价值度是通过科学的评估模
型对专利价值进行量化的结果,
基于专利大数据针对专利总体特
征指标利用计算机自动化技术对
待评估专利进行高效、智能化的
分析,从技术、经济和法律价值
三个层面构建专利价值评估体
系,可以有效提升专利价值评估
的质量和效率。
总评:61.0分
该专利价值中等 (仅供参考)
技术价值 31.0
该指标主要从专利申请的著录信息、法律事件等内容中挖掘其技术价值,专利类型、独立权利要求数量、无效请求次数等内容均可反映出专利的技术性价值。 技术创新是专利申请的核心,若您需要进行技术借鉴或寻找可合作的项目,推荐您重点关注该指标。
部分指标包括:
授权周期(发明)
19 个月独立权利要求数量
0 个从属权利要求数量
0 个说明书页数
14 页实施例个数
0 个发明人数量
3 个被引用次数
0 次引用文献数量
0 个优先权个数
0 个技术分类数量
1 个无效请求次数
0 个分案子案个数
0 个同族专利数
0 个专利获奖情况
无保密专利的解密
否经济价值 8.0
该指标主要指示了专利技术在商品化、产业化及市场化过程中可能带来的预期利益。 专利技术只有转化成生产力才能体现其经济价值,专利技术的许可、转让、质押次数等指标均是其经济价值的表征。 因此,若您希望找到行业内的运用广泛的热点专利技术及侵权诉讼中的涉案专利,推荐您重点关注该指标。
部分指标包括:
申请人数量
1申请人类型
企业许可备案
0 次权利质押
0 次权利转移
0 个海关备案
否法律价值 22.0
该指标主要从专利权的稳定性角度评议其价值。专利权是一种垄断权,但其在法律保护的期间和范围内才有效。 专利权的存续时间、当前的法律状态可反映出其法律价值。故而,若您准备找寻权属稳定且专利权人非常重视的专利技术,推荐您关注该指标。
部分指标包括:
存活期/维持时间
12法律状态
有权-审定授权