下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，下述实施例只是用于解释本发明，而不是对本发明的技术方案的限制。 

实施例1：

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）      0.1mol/L，

氯化钴                      20mmol/L，

PC-300                      1g/L，

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         1mol/L，

二硫苏糖醇                  20mmol/L，

PC-300                      1g/L。

实施例1中的配方为FDA认可的市场上常规应用的一种配方，用作理论对照。 

试剂 1 和试剂 2 的配制方法为常规方法，即试剂 1 和试剂 2 所述组分分别加入蒸馏水后各自混合搅匀即可。 

本发明试剂盒测定样本中的 IMA 的测试条件如下 ： 

温度：37 ℃；比色杯光径为1.0 cm。检测波长 510 nm。（现在临床全自动生化分析仪器都能够达到该要求）

应用本发明IMA测定试剂盒测定样本中IMA的方法如下 ：

样品（检测的样品包括蒸馏水、标准品和临床样本）加试剂1混匀，37℃孵育5 min后读取吸光度A0，立即加入试剂2混匀，37℃反应 5 min 后，读取吸光度 A1，ΔA ＝ A1-A0。其中样本用量30μl，试剂1用量 200μl，试剂2用量 100μl。

本发明试剂盒测定样本中 IMA 含量按以下公式进行计算 ： 

单位定义 ：每 ml 血清中白蛋白失去结合 1μg 钴离子的能力为 1 U。

实施例2：

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.1mol/L

氯化钴                      20mmol/L

PC-300                      1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         1mol/L

二硫苏糖醇                  20mmol/L

巯基乙醇                    6mol/L

PC-300                      1g/L

实施例 2 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

实施例3

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.1mol/L

氯化钴                      20mmol/L

PC-300                      1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         1mol/L

二硫苏糖醇                  20mmol/L

亚硫酸氢钠                   6mol/L

PC-300                      1g/L

实施例 3 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

实施例4：

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.1mol/L

氯化钴                      20mmol/L

三乙醇胺                    0.5g/L

PC-300                      1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         1mol/L

二硫苏糖醇                  20mmol/L

巯基乙醇                    6mol/L

三乙醇胺                    0.5g/L

PC-300                      1g/L

实施例 4 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

实施例5：

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.05mol/L

氯化钴                      10mmol/L

三乙醇胺                    0.1g/L

PC-300                      0.1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         0.5mol/L

二硫苏糖醇                  20mmol/L

巯基乙醇                    1mol/L

十六烷基糖苷                0.1g/L

PC-300                      0.1g/L

实施例 5 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

实施例6：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.5mol/L

氯化钴                      40mmol/L

三乙醇胺                    5g/L

PC-300                      1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         5mol/L

二硫苏糖醇                  40mmol/L

巯基乙醇                    10mol/L

TX-100                      5g/L

PC-300                      1g/L

实施例6 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

实施例7：

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.1mol/L

氯化钴                      20mmol/L

三乙醇胺                    0.5g/L

PC-300                      1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         1mol/L

二硫苏糖醇                  20mmol/L

巯基乙醇                    6mol/L

烷基酚聚氧乙烯醚            0.5g/L

PC-300                      1g/L

实施例 7 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

实施例8：

试剂1各组分及浓度为：

Tris缓冲液 （pH 7.6）        0.1mol/L

氯化钴                      20mmol/L

三乙醇胺                    0.5g/L

PC-300                      1g/L

试剂2各组分及浓度为：

咪唑缓冲液（pH 7.0）         1mol/L

二硫苏糖醇                  20mmol/L

巯基乙醇                    6mol/L

吐温-20                     0.5g/L

PC-300                      1g/L

实施例 8 试剂盒的制备方法同实施例 1，检测方法同实施例1。

试剂盒效率验证

对理论靶值为20.4U/mL的样本1 、44.1U/mL的样本2、76.4 U/mL的样本3、114.6 U/mL的样本4、143.9U/mL的样本5在相同的检测条件下，采用实施例1、2、3、4制备的试剂盒对各个浓度进行检测，结果如表1所示：

表1 不同实施例检测反应达到终点的时间

由以上数据明显显示，本发明实施例4 配制的试剂达到终点的时间明显加快，说明试剂盒中加入去干扰剂和稳定剂显著加快了反应达到终点的试剂，试剂盒反应效率明显提高。

准确性、精密度实验

对靶值为 63.1±5 U/mL 的质控液Ⅰ和靶值为 76.4±5 U/mL 的质控液Ⅱ在相同条件下，采用实施例4、5、6、7、8制备的试剂盒对同一质控液的同一浓度连续检测20次，将检测结果的平均值与靶值范围进行比较，以检测所述的试剂盒的准确性，同时比较每个测定的变异系数，以检测所述的试剂盒实施例的准确性和精密度，结果如表2 所示：

表2试剂盒准确度、精密度检测结果

    经过对中低值质控品检测，采用实施例4、5、6、7、8制备的试剂盒准确度在靶值要求的范围内，达到准确度要求，其中采用实施例4、5、6制备的试剂盒重复20次检测的变异系数都小于3，达到常规生化试剂CV（变异系数）≤5%的要求，而采用实施例7、8制备的试剂盒重复20次检测的变异系数出现大于5%的情况，本发明选用三乙醇胺、十六烷基糖苷或TX-100作为试剂2的稳定剂，更好地改善了试剂的准确度和精密度。

试剂盒稳定性实验

（1）37℃加速稳定性实验

将实施例4、7、8配制的试剂进行 37℃加速稳定性实验（37℃加速稳定性试验保证了试剂在运输和短期存放期间的稳定性），需要达到7天后检测结果依然在靶值范围内。操作流程为：采用实施例4、7、8制备的试剂盒，分别按照试剂装量要求进行分装，三种试剂盒各需要8组试剂，每组试剂包含一瓶试剂1和一瓶试剂2，将24组试剂瓶放置在37℃水浴锅内，每种试剂盒每天定时取出一组对靶值为76.4±5 U/mL质控品进行检测，检测结果如表3所示 ：

表3 37℃加速稳定性实验检测结果

    通过以上数据，采用实施例4配制的试剂盒，虽然检测结果出现下降，但是结果偏差不大，经过37℃热加速7天后，检测结果还是在靶值范围内，采用实施例7、8配制的试剂盒随着时间增长，在37℃加速试验中检测结果下降严重，3天后已经严重偏出质控范围，对比检测结果，本发明实施例4配制的试剂37℃加速稳定性好。

（2）4-8 ℃稳定性实验 

将实施例4、7、8配制的试剂进行4-8℃稳定性实验，检测试剂能否稳定保存 1 年，即在一年时间内检测结果都在靶值范围内。操作流程为：采用实施例4、7、8制备的试剂盒，分别按照试剂装量要求进行分装，两种试剂盒各需要13组试剂，每组试剂包含一瓶试剂1和一瓶试剂2，将39组试剂瓶放置在4-8℃冰箱内，每种试剂盒每天定时取出一组对靶值为76.4±5 U/mL质控品进行检测，检测结果如图1所示：

通过图1检测结果的变化趋势，采用实施例4配制的试剂随着放置时间的增长，试剂检测结果出现下滑，但是到一年（12个月）后，检测结果依旧在靶值范围内。然而采用实施例7、8配制的试剂，检测结果持续下降，在4个月后已经查处靶值的范围。通过对比检测结果，本发明采用实施例4配制的试剂盒能在4-8 ℃稳定保存12个月。

由稳定性检测数据显示，本发明采用实施例4配制的试剂稳定性好，能在37℃环境下稳定放置7天，同时在4-8℃闭瓶保存稳定12 个月，完全满足临床检验的需要。 

试剂盒比对相关性试验

采用实施例4配制的试剂，与市场上常见公认的某缺血修饰白蛋白检测试剂盒（比色法）进行对照检测，同时检测了40个临床血清样本，检测结果如图2所示，并获得了两种试剂的相关性曲线。通过图2检测结果显示，两个试剂盒的相关系数为0.9978，说明了两者有极大的相关性，从而证明了本发明的试剂盒与市场上应用的试剂盒临床检测结果具有一致性。