为了更好的理解本发明，下面结合具体实施例来进一步说明。 

实施例1：

一种检测丙肝核心抗原的标记物，是通过以下步骤得到的：

（1）活化的辣根过氧化物酶HRP，与L-赖氨酸羧甲基半胱氨酸聚合物按照20∶ 1的摩尔比混合，室温条件下反应2h，经封闭液处理后分离未连接的HRP，收集第1 洗脱峰，为L-赖氨酸羧甲基半胱氨酸与HRP的结合物，加入10％体积的10mg／mLEMCS，室温反应2.5 h洗脱得到结合物；

（2）纯化的单抗，调整浓度至5.0mg/mL，每毫升中加入6.0mgβ-巯基乙胺，37℃保温90 min洗脱还原，将还原的抗体与结合物按照质量比1∶1的比例混合，4℃避光反应24h，过Superdex 200 分子筛层析柱洗脱，收集第一峰，即得。

对比实施例1：过碘酸钠法得到的标记物

应用传统的配比配方及浓度，HRP：IgG按照摩尔比5:1加入到标记抗体中，经 pH 值调整、封闭等步骤后分离纯化酶标抗体。

灵敏度检测试验

1、血清的处理及保存

为保证实验的准确性，降低干扰，血清的处理及保存严格按以下操作执行 （1）血清在操作过程中避免任何细胞刺激，使用不含热原和内毒素的试管，收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离； （2） 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物； （3）如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻；如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤，不要在37℃或更高的温度加热解冻，应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

2、采用两种标记物以ELISA 法检测HCV核心抗原 

2.1 实验方法

将两种标记物稀释成ELISA 工作液（含HRP 500ng/mL），用相同的酶标板及检测系统分别进行检测。检测之前，首先对人血清样本进行预处理，将预处理好的血清样本和HCV核心抗原加入含有抗HCV 核心抗原抗体的微孔中，每个小孔加入样本液100μL，37℃反应1小时；用稀释过的清洗液洗板5次后，分别加入100μL两种标记物，37℃条件下反应半小时；清洗一次后加入底物，显色10 min ，测定450 nm下各孔的吸光值。

结果判定：Cutoff 值＝阴性样本平均值×2.1。 

2.2 两种标记物检测灵敏度的比较 

将HCV 核心抗原系列稀释，每次检测10 孔，分别检测3次，计算A450值的平均值及标准差（s），按公式x+2s得到的A1值与系列稀释抗原的A 值进行比较，其高于A1 值的HCV 核心抗原最低稀释度为检测的灵敏度。

过碘酸钠法标记物的最低检测限为10.0pg/mL，本发明标记物的最低检测限为2.0pg/mL，见表1。 

表1  两种标记物灵敏度测定的平均值 

 2.3  两种标记物检测临床血清标本的比较

分别用两种标记物检测正常人血清标本450份、HCV 抗体阳性血清标本200份和HCV核心抗原阳性血清标本200份，比较检测结果之间的差异。

其中，检测的450 份正常人血清标本，结果均为阴性，符合率100%，表明两者的特异性良好。 

本发明标记物与过碘酸钠标记物相比，在使用ELISA针对HCV抗体阳性血清、HCV核心抗原阳性血清检测中均可降低假阴性比例，从而提高检测的灵敏度。见表2。 

表2  两种标记物检测临床血清结果比较 

 本研究所制备的聚合物标记物的每个标记物上可连接多个抗体分子，同时在HRP的外围或多聚多肽上连接数个抗体分子。采用双抗体夹心酶联免疫法检测丙型肝炎病毒核心抗原，配以阴阳对照以及显色剂等试剂，定性检测人血清样品中丙型肝炎病毒核心抗原。该系统验证结论的同时，具有耗时短、试剂稳定性好、无污染等优点。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受实施例的限制，其它任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的改变、修饰、组合、替代、简化均应为等效替换方式，都包含在本发明的保护范围之内。